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TD-WS臺式大容量離心機提取乳酸脫氫酶及輔酶的方法

更新時間:2016-08-09      點擊次數:2583
   通過離心提取乳酸脫氫酶及輔酶用到的材料、試劑及設備有:(1)動物后腿肌肉;(2)9g/LNaCl溶液;(3)活性炭;(4)10g/L乳酸鋰溶液;(5)5g/LKCN溶液;(6)乳缽;(7)TD-WS臺式大容量離心機等。
 
  TD-WS臺式大容量離心機提取乳酸脫氫酶及輔酶的具體操作方法:
 
1、輔酶I的制備:取動物后腿肌肉2g置沸水浴中煮沸4—5分鐘(抑制酶的活力,防止將輔酶I破壞),取出冷卻、剪碎,加入少許9g/LNaCl溶液及細沙用乳缽研磨成糊狀,再加9g/LNaCl溶液8ml混勻,利用臺式離心機進行離心沉淀,收集上清液,儲冰箱備用。
 
2、乳酸脫氫酶酶蛋白的提?。喝游锖笸燃∪?g置乳缽中,加入少許9g/LNaCl溶液及細砂,仔細研磨后再加9g/LNaCl溶液8ml混勻,用雙層紗布過濾,濾液加活性炭0.5g振搖數分鐘后放置半小時,并時常搖動,然后通過TD-WS臺式大容量離心機離心分離,取上清液備用。
 
  在細菌學診斷工作中,常需要從被檢材料中分離細菌,并獲得純培養(即單*種細菌的培養物)。因此,通常要用到離心機對樣品進行離心分離,細菌的離心機分離培養技術是細菌學診斷中的一項重要基本操作。根據被檢材料中可能存在的病原苗的特性,選擇適當的培養基和培養條件:(溫度、氣體環境等)。進行未知菌的初次分離,多用幾種培養基,如肉湯、鮮血瓊脂、麥康克瓊脂等,每種培養基接種數管,分別放在普通環境和厭氧環境中培養。一般經過24—78小時觀察結果,但也有一些病原菌,需要培養校長時間才能生長。
 
3、TD-WS臺式大容量離心機使用過程注意事項 
 
(1)離心機套管底部要墊棉花或試管墊。  
(2)電動離心機如有噪音或機身振動時,應立即切斷電源,即時排除故障。  
(3)離心管必須對稱放入套管中,防止機身振動,若只有一支樣品管另外一支要用等質量的水代替。  
(4)啟動離心機時,應蓋上離心機頂蓋后,方可慢慢啟動。  
(5)分離結束后,先關閉離心機,在離心機停止轉動后,方可打開離心機蓋,取出樣品,不可用外力強制其停止運動。  
(6)離心時間一般1~2分鐘,在此期間,實驗者不得離開去做別的事。
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